بررسی اثر القاء‌کنندگی لاکتوز و IPTG بر بیان ژن اینتر فرون بتا 1 بی در باکتری (Escherichia coli BL21 (DE3

Authors

  • مرادیان, کبری دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات، گروه زیست شناسی، تهران، ایران
  • عابدی, داریوش گروه بیوتکنولوژی دارویی، دانشکده داروسازی و علوم دارویی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
  • فاضلی , محمد رضا گروه کنترل دارو و غذا، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران
Abstract:

سابقه و هدف: پروموتر [1] lac یک ژن تنظیم کننده پروکاریوتی بیان پروتئین نوترکیب در Escherichia coli می­باشد. این پروموتر توسط لاکتوز و یا آنالوگ شیمیایی آن[2] IPTG القا می­شود. در این تحقیق تأثیر لاکتوز و  IPTGبر میزان بیان ژن اینترفرون بتا ، مقایسه شده است. مواد و روش ­ها: باکتری (Escherichia coli BL21 (DE3  کلون شده با ژن اینترفرون بتا کشت داده شد و با اضافه کردن غلظت مشخصIPTG و لاکتوز به طور جداگانه و یا با یکدیگر، بیان پروتئین القا گردید. میزان پروتئین اینترفرون تولید شده اندازه­گیری شد.       یافته ­ها: میزان بیان پروتئین اینتر فرون بتا 1 بی با استفاده از 2/0 % لاکتوز وIPTG 5/0 میلی­مولار به­طور هم­زمان نسبت به هر کدام از القاء­کننده­ها به تنهایی افزایش داشت و برابر با 34% کل پروتئین­های تولید شده توسط باکتری اشریشیاکلی نوترکیب بود. نتیجه­ گیری: در این تحقیق، با استفاده هم­زمان لاکتوز وIPTG ، در مقایسه با هر کدام از این القاء کننده­ها به تنهایی، میزان بیش­تر پروتئین اینترفرون بتا 1 بی با هزینه کم­تر تولید شد.   [1] Lactose [2] Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

Exacerbation of substrate toxicity by IPTG in Escherichia coli BL21(DE3) carrying a synthetic metabolic pathway

BACKGROUND Heterologous expression systems based on promoters inducible with isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG), e.g., Escherichia coli BL21(DE3) and cognate LacI(Q)/P(lacUV5)-T7 vectors, are commonly used for production of recombinant proteins and metabolic pathways. The applicability of such cell factories is limited by the complex physiological burden imposed by overexpression of t...

full text

Genomic and transcriptomic landscape of Escherichia coli BL21(DE3)

Escherichia coli BL21(DE3) has long served as a model organism for scientific research, as well as a workhorse for biotechnology. Here we present the most current genome annotation of E. coli BL21(DE3) based on the transcriptome structure of the strain that was determined for the first time. The genome was annotated using multiple automated pipelines and compared to the current genome annotatio...

full text

High-level production of membrane proteins in E. coli BL21(DE3) by omitting the inducer IPTG

BACKGROUND For membrane protein production, the Escherichia coli T7 RNA polymerase (T7 RNAP)-based protein production strain BL21(DE3) in combination with T7-promoter based expression vectors is widely used. Cells are routinely cultured in Lysogeny broth (LB medium) and expression of the chromosomally localized t7rnap gene is governed by the isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) inducibl...

full text

Complete Genome Sequence of Escherichia coli BLR(DE3), a recA-Deficient Derivative of E. coli BL21(DE3)

Escherichia coli BLR(DE3) is a commercially available recA-deficient derivative of BL21(DE3), one of the most widely used strains for recombinant protein expression. Here, we present the full-genome sequence of BLR(DE3) and highlight additional differences with its parent strain BL21(DE3) which were previously unreported but may affect its physiology.

full text

The toxicity of recombinant proteins in Escherichia coli: a comparison of overexpression in BL21(DE3), C41(DE3), and C43(DE3).

Two mutant strains of Escherichia coli BL21(DE3), called C41(DE3) and C43(DE3) and originally described by Miroux and Walker, are frequently used to overcome the toxicity associated with overexpressing recombinant proteins using the bacteriophage T7 RNA polymerase expression system. Even when the toxicity of the plasmids is so high that it prevents transformation in the strain BL21(DE3), the to...

full text

بهینه‏سازی کدونی و مقایسه‏ی بیان فاکتور رشد عصبی بتا انسانی (β-NGF) بصورت نوترکیب در میزبان‏های باکتریایی( BL21(DE3 و BL21(DE3)pLysS

فاکتور رشد عصبی بتا (β-NGF) برای اولین بار بدلیل نقش حیاتی‌اش در رشد و بقای سلول‏های عصبی مورد مطالعه قرار گرفت. این پروتئین که به خانواده‌ی نوروتروفین‌ها تعلق دارد در درمان بیماری‌های تخریب عصبی نظیر آلزایمر دارای نقش قابل ملاحظه‏ای می‏باشد. بدین منظور، β-NGF انسانی نوترکیب برای اولین‏بار در ایران در دو سویه‏ی متفاوت باکتری E.coli بیان شد. از آنجاییکه β-NGF در ساختار فعال و عملکردی خود دارای س...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 7  issue None

pages  9- 16

publication date 2017-09

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023